Xét nghiệm miễn dịch hóa phát quang, CLIA là một kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch có độ nhạy cao.
1. Nguyên tắc
Xét nghiệm miễn dịch phát quang hóa học kết hợp tính đặc hiệu của phản ứng miễn dịch và độ nhạy cao của phát quang hóa học. Nguyên lý cơ bản của nó là kết hợp phản ứng miễn dịch đặc hiệu giữa kháng nguyên và kháng thể với phản ứng phát quang hóa học. Cụ thể, kháng nguyên trong mẫu cần xét nghiệm kết hợp với kháng thể đặc hiệu để tạo thành phức hợp miễn dịch. Sau đó, thông qua một loạt các phản ứng hóa học, phức hợp miễn dịch tạo ra tín hiệu phát quang hóa học. Cường độ phát quang tỷ lệ thuận với nồng độ kháng nguyên cần xét nghiệm và hàm lượng kháng nguyên cần xét nghiệm có thể được phân tích định lượng bằng cách phát hiện cường độ phát quang.
2. Các thành phần chính
Kháng thể: bao gồm kháng thể bắt giữ và kháng thể phát hiện. Kháng thể bắt giữ thường được cố định trên chất mang pha rắn để bắt giữ kháng nguyên cần thử nghiệm. Kháng thể phát hiện được kết hợp với chất đánh dấu phát quang hóa học để phát hiện kháng nguyên trong phức hợp miễn dịch.
Chất mang pha rắn: như microplate, hạt từ tính, v.v., dùng để cố định kháng thể bắt giữ nhằm tạo điều kiện cho phản ứng miễn dịch và tách, rửa.
Chất đánh dấu phát quang hóa học: thường là chất có khả năng tạo ra tín hiệu phát quang trong phản ứng hóa học, chẳng hạn như luminol, este acridinium, v.v. Chất đánh dấu kết hợp với kháng thể phát hiện để tạo ra tín hiệu phát quang hóa học sau phản ứng miễn dịch.
Hệ thống phát hiện: bao gồm các thiết bị như máy dò phát quang, được sử dụng để phát hiện cường độ tín hiệu phát quang hóa học và chuyển đổi chúng thành giá trị có thể đọc được.
3. Tính năng
Độ nhạy cao: Có thể phát hiện nồng độ cực thấp của chất thử, thường nhạy hơn nhiều lần so với các phương pháp xét nghiệm miễn dịch truyền thống.
Phạm vi tuyến tính rộng: Có thể đo chính xác hàm lượng chất thử trong phạm vi nồng độ rộng mà không cần pha loãng nhiều lần.
Tính đặc hiệu cao: Dựa trên sự liên kết đặc hiệu của kháng nguyên và kháng thể, có tính chọn lọc cao đối với các chất thử cụ thể.
Nhanh chóng: Quá trình phát hiện tương đối nhanh và thường có thể nhận được kết quả trong thời gian ngắn hơn.
Mức độ tự động hóa cao: Thích hợp để phát hiện các mẫu có quy mô lớn và có thể được sử dụng kết hợp với các thiết bị tự động để nâng cao hiệu quả phát hiện.
4. Các lĩnh vực ứng dụng
Chẩn đoán lâm sàng: Được sử dụng để phát hiện nhiều dấu hiệu sinh học khác nhau, chẳng hạn như dấu hiệu khối u, hormone, dấu hiệu bệnh truyền nhiễm, v.v., để cung cấp cơ sở quan trọng cho việc chẩn đoán bệnh, theo dõi điều trị và đánh giá tiên lượng.
Phát triển thuốc: Được sử dụng để theo dõi nồng độ thuốc, đánh giá hiệu quả và nghiên cứu chuyển hóa thuốc.
Kiểm tra an toàn thực phẩm: Phát hiện các chất độc hại, dư lượng thuốc trừ sâu, dư lượng thuốc thú y,… trong thực phẩm.
Giám sát môi trường: Phát hiện các chất ô nhiễm và chất độc hại trong môi trường.